告别“靠天吃飯”，微藻異養培養大顯身手

　　在進入今天的主題前，首先向大家明确幾個基本概念。我們知道，能源和碳源作爲一切生物生長的基礎，所謂的“光合自養”“光能異養”“化能自養”和“化能異養”型生物，它們的差異也主要體現在這幾個方面。

　　“光合自養”型生物中的能源和碳源來源分别爲光和二氧化碳，與其不同的是，“光合異養”型生物中隻以有機化合物而非二氧化碳作爲它們的碳源。“化能自養”型生物中的能量來源是通過無機或有機化合物的氧化作用，其碳源是二氧化碳，而“化能異養”型生物生長所需的能源和碳源均爲有機化合物（如葡萄糖）。

　　“靠天吃飯”的光自養培養模式

　　微藻是單細胞生物，可以用作生産能源、食品、飼料的原料，在工業領域有着廣闊的應用前景。

　　一直以來，藻類被認爲像高等植物一樣必須通過光合作用（利用光和二氧化碳）才能實現細胞生物質合成，即光自養培養模式。但這種培養模式基本隻能“靠天吃飯”，受外界環境條件如溫度、光強、日照時間等的限制，細胞濃度較低，一般隻能達到0.5-1.5g/L。

　　圖1開放式跑道池自養培養

　　此外，開放式光自養培養模式下的微藻易遭受浮遊動物或細菌污染，正因如此，通過這種培養方式進行商業化生産的微藻品種極其有限，僅有耐強堿（pH9-10）螺旋藻、耐高鹽（NaCl濃度高于30%）杜氏鹽藻和能夠快速增殖的小球藻。

　　圖2自養培養下小球藻被浮遊動物吞噬

　　異養模式雖好，但是也不是所有微藻都适用

　　實際上，很多微藻可不依賴于光和二氧化碳，它們可以在完全黑暗條件下利用有機物質進行異養生長。由于這種培養方式擺脫了對光的限制，微藻的生長速率比在光照條件下快得多，優勢也是顯而易見：

　　l微藻異養培養所需的能源及碳源均由有機碳源來提供，首先解決了能源限制問題；

　　l由于異養是在密閉的發酵罐中進行，整個培養系統采用蒸汽進行滅菌，從而解決了被其它微生物污染的問題；

　　l異養培養過程中的溫度、pH、營養物的供應等都能得到較好的控制，細胞濃度可高達到100-200g/L。

　　然而，并非所有的微藻都能夠進行異養生長。不能異養培養的最主要因素是，微藻自身不具備完善的吸收利用胞外有機碳和有機氮的機制。

　　具體來說，一是有些微藻因爲有機物難以透過細胞膜進入細胞或者缺乏濃縮有機物的能力而不能被異養；二是有機物在細胞内進行代謝所需的酶系統不完善,有機物不能被有效利用,造成某些微藻難以異養；三是在異養條件下,某些微藻因呼吸作用所提供的能量不足以維持其生長而不能異養。

　　據統計，迄今爲止被業界篩選出來适合異養方式培養的微藻有多個門類幾十個藻種，其中小球藻、隐甲藻、裂壺藻、部分矽藻在異養培養方式研究中及量産化方面較爲成熟。同時，也有研究采用代謝工程的方式，通過轉基因來擴大微藻異養培養的品種及使用範圍。例如，國外學者通過轉入葡萄糖轉運酶基因，使不能異養培養的三角褐指藻實現了利用葡萄糖進行異養生長。

　　在生化組成上，異養和自養培養所獲得的微藻成分的區别主要在一些色素含量方面，例如光合自養所得的葉綠素和某些類胡蘿蔔素的含量會多些，但最重要的成分通常不會受到影響。研究表明，天然蝦青素（一種高抗氧化活性類胡蘿蔔素）在微藻體内的生物合成也不一定需要光來誘導，完全可以通過施予某些脅迫因子來誘導産生。

　　微藻異養，更适合工業化生産

　　十多年的實踐表明，微藻異養培養由于可控性強更适合工業化生産，與之相比，光合自養培養更像原始農業，可重複性差。然而，異養培養也存在建設成本大、運行成本高等缺點。目前，這種培養模式僅适用于高附加值産品的生産。例如，利用裂殖壺藻或隐甲藻來發酵生産DHA、利用蛋白核小球藻和裸藻異養發酵生産富含蛋白和β-1，3葡聚糖的食品等。

　　圖3微藻發酵罐異養培養

　　受技術水平所限，當前微藻在異養培養條件下能夠達到的生物量濃度仍然很低，制約了微藻的工業化應用。最近，中國科學院水生生物研究所的研究人員以一株可異養培養的富油栅藻爲研究對象，通過有效的發酵過程優化，尤其是精準的葡萄糖濃度控制這一關鍵技術的突破，實現了該富油栅藻的超高密度培養，最高細胞濃度達到286g/L，比光自養培養提高了100-200倍，解決了微藻大規模工業化應用的問題。

　　圖4異養高密度培養後培養液離心前後比較

　　微藻作爲一種重要的資源,如何實現微藻的高細胞密度養殖已經成爲微藻産業發展的關鍵問題。微藻異養培養能從根本上解決自養受光照影響的問題，已成爲微藻培養的主要發展方向。

　　來源：中國科學院水生生物研究所